Spektrofotometer UV-Vis: fungsi, cara kerja, dan parameter yang perlu diperhatikan

Apa fungsinya

Spektrofotometer UV-Vis dipakai untuk mengetahui berapa banyak suatu zat dalam larutan. Alat ini menyinari sampel dengan cahaya pada panjang gelombang tertentu dan mengukur berapa banyak cahaya yang diserap. Semakin pekat larutan, semakin banyak cahaya yang diserap, dan dari situ konsentrasinya dapat dihitung.

Cara kerja secara sederhana

Cahaya dari lampu diarahkan ke bagian pemisah warna (monokromator) yang hanya meloloskan satu panjang gelombang. Cahaya itu lalu melewati kuvet berisi sampel, dan detektor di sisi lain mengukur seberapa banyak cahaya yang tersisa. Perbandingan antara cahaya yang masuk dan yang keluar dinyatakan sebagai absorbansi.

Hubungan absorbansi dengan konsentrasi mengikuti hukum Beer-Lambert: absorbansi sebanding dengan konsentrasi zat dan panjang jalur cahaya di dalam kuvet. Karena hubungan ini lurus pada rentang tertentu, konsentrasi sampel dapat dibaca dari kurva kalibrasi yang dibuat dengan larutan standar.

Untuk apa dipakai, dan contohnya

• Menentukan kadar senyawa berwarna atau yang dapat diubah menjadi berwarna dengan reagen, misalnya fosfat, nitrit, atau besi dalam air.
• Mengukur kadar protein dan aktivitas enzim di laboratorium biokimia dan klinik.
• Penetapan kadar zat aktif dalam sediaan obat.
• Memeriksa kemurnian dan konsentrasi asam nukleat pada laboratorium biologi molekuler.
• Memantau warna atau kandungan tertentu pada produk pangan dan minuman.

Siapa yang biasanya membutuhkan

Laboratorium kimia dan biokimia di universitas, laboratorium lingkungan yang menguji air dan air limbah, laboratorium pengendalian mutu di industri farmasi, pangan, dan minuman, serta laboratorium klinik dan penelitian. Karena serbaguna dan relatif ekonomis dibanding instrumen lain, spektrofotometer termasuk alat yang paling banyak dijumpai di laboratorium analitik.

Parameter yang perlu diperhatikan