Cara menggunakan micropipette dengan benar: dari mengatur volume sampai membuang tip

Micropipette dipakai untuk memindahkan cairan dalam volume mikroliter sampai satu-dua mililiter. Alat ini bekerja dengan piston yang menggeser udara di dalam badan pipet: udara itulah yang menarik dan mendorong cairan. Karena itu ketelitiannya sangat bergantung pada kebiasaan tangan pemakainya, sama besarnya dengan mutu alat itu sendiri.

Sebelum mulai

• Pastikan volume yang Anda perlukan berada di dalam rentang pipet. Lihat angka rentang pada tombol atau badan pipet.
• Pilih tip yang sesuai dengan pipet, dan pastikan tip bersih dan tidak retak.
• Biarkan cairan dan pipet berada pada suhu ruang. Cairan dingin dari lemari pendingin akan menyusut saat dipipet dan menghasilkan volume yang keliru.

Langkah pemakaian (forward pipetting)

1. 1

   Atur volume

   Putar tombol pengatur sampai angka yang diinginkan muncul. Untuk mendekati angka yang lebih kecil, putar turun perlahan; bila melewati, putar naik lalu turun lagi. Jangan memutar melewati batas rentang pipet.

2. 2

   Pasang tip

   Tekan ujung pipet pada tip dengan gerakan menekan yang mantap. Jangan mengetuk-ngetukkan pipet untuk memasang tip karena dapat merusak mekanisme dalamnya.

3. 3

   Bilas tip (prewet)

   Hisap dan buang cairan yang sama satu atau dua kali. Langkah ini melembapkan bagian dalam tip dan memperbaiki ketelitian, terutama untuk volume kecil dan cairan yang mudah menguap.

4. 4

   Tekan sampai stop pertama

   Tekan tombol perlahan sampai terasa tahanan pertama, lalu tahan. Pegang pipet tegak.

5. 5

   Hisap cairan

   Celupkan ujung tip sekitar 2 sampai 3 mm di bawah permukaan cairan, lalu lepaskan tombol dengan halus dan tetap. Tunggu satu detik sebelum mengangkat tip agar cairan naik sempurna.

6. 6

   Bersihkan tetes di luar tip

   Angkat tip dari cairan, lalu sentuhkan ke dinding wadah agar tetes di bagian luar tidak ikut terbawa. Jangan menyeka ujung tip dengan tisu karena dapat menyedot cairan keluar.

7. 7

   Keluarkan cairan

   Tempelkan ujung tip pada dinding wadah tujuan, lalu tekan tombol pelan sampai stop pertama, dan lanjutkan sampai stop kedua untuk mengeluarkan sisa. Tarik tip ke atas sambil tombol tetap tertekan.

8. 8

   Buang tip

   Tekan tombol pelepas tip di atas wadah limbah. Gunakan tip baru untuk setiap sampel.

Kapan memakai reverse pipetting

Untuk cairan yang kental (gliserol, larutan protein pekat) atau yang mudah berbusa (deterjen, serum), forward pipetting cenderung menghasilkan gelembung dan volume kurang. Pada reverse pipetting, tombol ditekan sampai stop kedua saat menghisap, lalu saat mengeluarkan hanya sampai stop pertama. Sisa cairan yang masih di dalam tip dibuang bersama tipnya. Cara ini membuat volume yang keluar lebih tepat dan mengurangi busa.

Kesalahan yang paling sering terjadi

• Menekan atau melepas tombol terlalu cepat. Cairan terhisap ke dalam badan pipet dan volume menjadi tidak tepat.
• Memegang pipet miring atau mendatar saat berisi cairan. Cairan bisa mengalir ke bagian dalam pipet dan merusak piston.
• Membiarkan pipet tergenggam lama. Panas tangan menghangatkan udara di dalamnya dan mengubah volume.
• Memutar pengatur volume di luar rentang, yang dapat merusak mekanisme.
• Memakai tip yang tidak cocok sehingga udara bocor di sambungan.